96孔板和6孔板药物浓度怎么转换,做SKOV3和SMMC7721的MTT实验请问MTT实验中96孔板中的合适
来源:整理 编辑:汇众招标 2023-08-07 13:34:36
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1,做SKOV3和SMMC7721的MTT实验请问MTT实验中96孔板中的合适
博凌科为解答:调整细胞浓度至1×105/ml,分别加入96孔板,每孔加200μL使每孔细胞数目是2×104个。
2,细胞实验新手请问细胞种板时怎么计算细胞浓度和要加
直径3.5厘米皿2ml培养基6厘米3ml10厘米6ml6孔板每个孔2ml,12孔板1ml,往后依次减半细胞浓度一般要看你细胞的增殖能力,一般细胞系的话传代按照1传4的比例种板就可以了,传同一大小的皿,不同大小的按比例推算直径3.5厘米皿2ml培养基6厘米3ml10厘米6ml6孔板每个孔2ml,12孔板1ml,往后依次减半细胞浓度一般要看你细胞的增殖能力,一般细胞系的话传代按照1传4的比例种板就可以了,传同一大小的皿,不同大小的按比例推算
3,96孔板的使用注意事项
和普通细胞培养一样,使用96孔板请注意你的细胞、培养基、用具无菌,尤其注意操作时气流方向,可能带菌的物品、手不要在上风处移动。请教:如何清洗6孔板、24孔板和96孔板?需要泡酸吗?用清水洗净后---泡酸---按常规清洗步骤清洗--泡于酒精中,用之前紫外照几小时,这种步骤后就可以放心使用乐,基本没有问题search!!too much information in dxy form!泡酸,如果是新配制的酸泡2到3个小时,旧酸则多泡2-3个小时,这些板一般可以重复使用4-5次注意:泡酸的时候不要用新配制好的强酸洗液,因为太强的酸可以腐蚀掉板底部的那层促进细胞贴壁的膜,造成培养的细胞难以贴壁。可以适当的稀释一些,再浸泡培养板过夜,清洗,泡于75%的酒精中(酒精要用质量高一点杂质少的酒精),用前可直接取出(或用无菌水清洗1到2次),在紫外线下照射1小时左右,即可使用。
4,细胞培养时怎样调整细胞浓度
细胞计数呗。根据所计数量和培养液体积确定接种的数量。铺板或者是传代都有大致的细胞数量的范围,根据这个确定培养液用量就是了。细胞培养时怎样调整细胞浓度1、一般96孔板,每孔是加100微升细胞悬液,从孔的左边靠近底部加入,加完半边板后,将未加的细胞悬液混一下再,继续加剩余的半边板子,都加完后盖上盖子,左手轻轻扶住板的左边,右手轻轻敲击板的右边缘,注意把握力度(一般轻巧敲三下),太强或次数太多会导致细胞集中成堆,将板顺时针旋转(逆时针效果不好),依次敲击剩余三个边,静置约5分钟,放入37度培养箱。6孔板12孔板或24孔板,均采用将第一个孔加入少量无血清培养基,晃动浸润整个孔底,然后用移液枪吸至第二孔,同样方法浸润孔底,其它孔一次类推,这样整个孔底都是湿润的,细胞悬液会平铺在整个孔底,加细胞悬液的时候可以避免加在中间中间细胞多,而加在周边晃匀后周边细胞多中间少的现象,细胞分散较均匀,注意加完细胞悬液后要放工作台静置一下。这个方法就是有点慢,但操作熟练了也不慢。也可以采用轻拍的方式,但力度没有96孔板好掌握,效果没有96孔板好,所以我放弃改用浸润孔底的方法。2、细胞悬液加完后,将细胞培养板抬高,对着灯光,从底部往上看,看细胞有没有抱团。然后从底部敲击,使之分散。3、如果实验室有平板振荡器的话,我建议用这个仪器稍振荡一下,效果不错,就是振幅小,频率高的那种。4、细胞要尽量打散,大部分呈单个状态。离心后,要充分悬浮!还有转移到六孔板后,是要晃得!晃的时候最好不要让那个细胞液转圈,不然细胞就全被带到中间去了,就会不均匀!5、一瓶细胞长满后,正常处理,在培养瓶里吹匀,然后铺6孔板,每孔2毫升,铺完之后不用观察直接用酒精棉擦拭,然后放到培养箱里,轻微的左三圈 右三圈 前三圈 后三圈。基本上24小时之后观察 每孔的细胞都会很均匀。
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